抑制呕吐、营养神经、促进代谢、预防血栓、治疗贫血……维生素B6的功效你了解过吗？

 

维生素B6（Vitamin B6）又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，遇光或碱易破坏，不耐高温。维生素B6为人体内某些辅酶的组成成分，参与多种代谢反应，尤其是和氨基酸代谢有密切关系。

 

在乳粉中，维生素B6作为营养强化剂使用。其添加量应遵循《GB 14880-2012 食品安全国家标准 食品营养强化剂使用标准》中的要求。对于婴幼儿配方乳粉中维生素B6的添加还应遵守其对应的产品标准《GB 10765-2010 食品安全国家标准 婴儿配方食品》及《GB 10767-2010 食品安全国家标准 较大婴儿和幼儿配方食品》。

 

检验其是否符合标准，可使用悟空K2025高效液相色谱仪测定。

 

01

实验准备

1、原理

样品经水提取，沉淀蛋白后，取上清液，采用液相色谱分离，荧光检测器检测，外标法定量。

 

2、色谱条件

 

悟空K2025高效液相色谱仪：K2025 P2二元高压输液泵、K2025 AS自动进样器、K2025 CO柱温箱、RF-20A 荧光检测器 、K2025ATD模数转换器、Wookinglab色谱工作站；

 

色谱柱：C₁₈ ，4.6×250 mm，5 μm或者相当的色谱柱；

流动相：流动相A为甲醇，流动相B为辛烷磺酸钠溶液，按下表进行梯度洗脱：

 

柱温：35℃；

进样量：10 μL；

检测器及波长：荧光检测器，激发波长为 293 nm，发射波长为395 nm。

 

02

实验结果

重复性测试

 

色谱图如图1所示，积分结果如表1所示。

图1维生素B6标准溶液的色谱图

 

表1 维生素B6标准溶液色谱图积分结果

 

由表1中数据可知，吡哆醛与吡哆醇的分离度为12.09，吡哆醇与吡哆胺的分离度为22.67，具有较好的分离度。三种物质的拖尾因子范围为1.06~1.12，均有良好的峰型。 

 

将维生素B6标准溶液连续进样7针，叠加的色谱图如图2所示，结果见表2。

图2 维生素B6溶液连续进样7针叠加的色谱图

 

表2维生素B6溶液连续进样7针重复性数据统计

 

由表2中数据可知，维生素B6各组分保留时间的RSD范围为0.026%~0.081%，峰面积的RSD范围为0.136%~0.328%，均具有良好的定性定量重复性。

 

含量测定

校准曲线

 

将配制好的维生素B6混合标准工作液在HPLC上进行测定叠加色谱图见图3。维生素B6各组分混合标准工作液在测定浓度范围内，曲线的确定系数R²≥0.9995，线性关系均良好。

 

图3 维生素B6混合标准工作液浓度系列曲线叠加色谱图

 

样品含量测定

 

以市售乳粉为样品，按照流程对样品进行处理，并计算样品中维生素B6各组分的含量。样品的色谱图如图4所示。

图4 乳4粉样品的色谱图

 

根据计算，此乳粉样品中维生素B6的含量为10.9 mg/100 g。

 

03

结论

 

通过对维生素B6各组分的峰型、重复性、灵敏度、线性的测试以及对乳粉样品中维生素B6的含量进行测定，实验结果表明：

 

用Wooking K2025高效液相色谱仪测定维生素B6，维生素B6各组分峰分离度均大于1.5，三种物质的拖尾因子范围为1.06~1.12，具有良好的分离度及峰型；重复性测试中，将维生素B6混合标准溶液连续进样7针，维生素B6各组分的保留时间的RSD范围为0.026%~0.081%，峰面积的RSD范围为0.136%~0.328%，均有良好的定性定量重复性；维生素B6各组分的仪器检出限均小于4.819 ng/mL，仪器定量限均小于16.064 ng/mL；在测定浓度范围内，维生素B6各组分均具有良好的线性关系，确定系数R²均≥0.9995；乳粉样品中维生素B6的含量为10.9 mg/100 g。

 

因此，Wooking K2025高效液相色谱仪可以满足《GB 5009.154-2016 食品安全国家标准 食品中维生素B6的测定（第一法）》中维生素B6含量测定的需求。