前言

化妆品中添加防腐剂，是平衡产品安全性与稳定性的核心措施。由于水分与营养丰富，化妆品极易成为微生物滋生的温床。合规使用防腐剂能有效防止发霉、变质，保护消费者健康。

我国《化妆品安全技术规范》对允许使用的50余种防腐剂有着严格的限制。

本方案参考《化妆品安全技术规范》防腐剂检验方法，基于悟空K2025高效液相色谱仪（配二极管阵列检测器），实现化妆品中吡硫鎓锌等19种防腐剂组分的高效准确测定，为化妆品质量与安全控制提供参考。

范围

本方法所指的19种组分包括吡硫鎓锌、水杨酸、山梨酸、苯氧异丙醇、2,6-二氯苯甲醇、苯甲酸甲酯、碘丙炔醇丁基氨甲酸酯、对氯间甲酚、2,4-二氯苯甲醇、邻苯基苯酚、邻伞花烃-5-醇、氯二甲酚、氯咪巴唑、苄氯酚、吡罗克酮乙醇胺盐、三氯卡班、三氯生、溴氯芬、硫柳汞钠。

本方法适用于水剂类、膏霜类、乳液类、凝胶类、油剂类、粉类和蜡基类化妆品中吡硫鎓锌等19种组分含量的测定。

实验方案

样品

市售面霜

色谱条件

a）色谱柱：AQ C18，4.6 mm×250 mm，5 μm或者相当的色谱柱；

b）流动相：以甲醇为流动相A，以磷酸二氢钠溶液（pH=3.80）为流动相B，梯度洗脱如下表：

c）流速：1.0 mL/min；

d）进样量：10 μL；

e）进样盘温度：25 ℃；

f）洗针液：90%甲醇水溶液；

g）柱温：温度时间程序如下表：

h）检测器及检测波长：检测器为二极管阵列检测器，吡硫鎓锌、水杨酸、山梨酸、苯氧异丙醇、邻伞花烃-5-醇、氯二甲酚、三氯卡班、三氯生的测定采用280 nm；2,6-二氯苯甲醇、苯甲酸甲酯、碘丙炔醇丁基氨甲酸酯、对氯间甲酚、2,4-二氯苯甲醇、邻苯基苯酚、氯咪巴唑、苄氯酚、吡罗克酮乙醇胺盐、溴氯芬、硫柳汞钠的测定采用230 nm。

标准溶液色谱图

按照色谱条件进行采集，18种组分混合标准溶液的色谱图如图1~图2所示，硫柳汞钠标准溶液的色谱图如图3所示，积分结果如表1所示。

（1：吡硫鎓锌；2：水杨酸；3：山梨酸；4：苯氧异丙醇；11：邻伞花烃-5-醇；12：氯二甲酚；16：三氯卡班；17：三氯生）

图1  18种组分混合标准溶液的色谱图（280 nm）

（5：2,6-二氯苯甲醇；6：苯甲酸甲酯；7：碘丙炔醇丁基氨甲酸酯；8：对氯间甲酚；9：2,4-二氯苯甲醇；10：邻苯基苯酚；13：氯咪巴唑；14：苄氯酚；15：吡罗克酮乙醇胺盐；18：溴氯芬）

图2  18种组分混合标准溶液的色谱图（230 nm）

（19：硫柳汞钠）

图3  硫柳汞钠标准溶液的色谱图（230 nm）

表1  19种组分标准溶液色谱图积分结果表

由表1中数据可知，18种组分混合标准溶液和硫柳汞钠标准溶液色谱图中，19种组分的理论塔板数范围为28431~643848，拖尾因子范围为0.90~1.62，峰形均良好；分离度范围为2.26~50.18，均可实现基线分离。

结论

结合重复性测试、试样含量测定、加标回收实验，本实验结果表明：

· 18种组分混合标准溶液和硫柳汞钠标准溶液色谱图中，19种组分的理论塔板数范围为28431~643848，拖尾因子范围为0.90~1.62，峰形均良好；分离度范围为2.26~50.18，均可实现基线分离；

· 重复性测试中，18种组分混合标准溶液和硫柳汞钠标准溶液连续进样7针，19种组分保留时间的RSD范围为0.27 %~0.68 %，峰面积的RSD范围为0.16 %~1.77 %，均具有良好的定性定量重复性；

· 19种组分在其浓度范围内均呈现良好的线性关系，相关系数r均＞0.999；

· 试样含量测定中，19种组分均未检出；

· 加标回收实验中，19种组分的加标回收率范围为102.9 %~118.5 %。

因此，悟空 K2025高效液相色谱仪配置二极管阵列检测器，满足《化妆品安全技术规范》中化妆品中吡硫鎓锌等19种组分含量测定的需求，且在分离度、精密度、准确度等方面表现良好。

注意事项

1. 2,6-二氯苯甲醇不属于《化妆品安全技术规范（2015年版）》准用防腐剂组分。

2. 硫柳汞钠因与水杨酸、吡硫鎓锌等物质发生螯合作用，故硫柳汞钠应单独配制标准系列溶液。

3. 水杨酸易于与金属离子络合，配方中含二氧化钛或氧化铁的产品，测定水杨酸含量时建议在提取溶剂甲醇中加入0.5 mmol/L EDTA-2Na。