Q：李工，我的色谱图有很多杂峰、鬼峰，基线噪声变大，这是怎么回事？

程工，我明明过滤了流动相，为什么管路还是堵了？：Q

Q：翟工，换了流动相，压力就突然升高是什么原因？

有人说实验是一门玄学，同一台仪器，别人用得好好的，自己一上手，总有意想不到的问题。以上这些令人抓狂的问题，你是否也遇到过？其实解决方法很简单，平时做对这3件事就能让“流动相引起的仪器异常”大大减少。

一、流动相瓶清洗：彻底除残留

流动相瓶的残留危害，远比我们想象中严重：瓶壁霉菌、挂壁杂质会污染新流动相，导致基线噪音大、峰形畸变；残留的旧溶剂会与新流动相反应（如有机相残留 + 盐相 = 结晶），堵塞管路和在线过滤片。

1.常规清洗：向瓶中加入适量洗洁精，用软毛刷刷洗瓶壁；先用大量自来水冲至无泡沫，再用超纯水冲洗 3 次以上，直至瓶壁不挂水、水不成股流下。

2.重点清洗：对于可能长霉的瓶子，先用稀硝酸或铬酸洗液润洗，再用常规清洗的方法清洗。

3.超声清洗：流动相瓶也可以用纯水或有机相进行超声清洗，若瓶壁严重挂壁，可先用铬酸洗液润洗，再常规清洗。

4.晾干备用：清洗干净后倒置晾干或低温烘干（40-60℃）备用，避免高温烘烤导致瓶子变形或形成污染。

二、溶剂处理：过滤 + 超声

未处理的溶剂中，杂质会堵塞色谱柱筛板；溶解氧会导致基线波动、峰形分裂。所以用色谱级试剂按实验要求配制的流动相，需要混匀后用0.22μm滤膜过滤并超声脱气20分钟。

那上文中提到的“明明过滤了流动相，管路还是堵了”是什么原因导致的呢？需要注意的是，滤膜有水系、有机系区分，要选择合适的滤膜，错误选择会导致过滤效率下降、滤膜溶解堵塞管路。

K2025HPLC内置在线脱气模块，减少流动相混合产生的气泡

三、流动相更换：分类型操作，避免结晶和粘连

流动相更换的核心原则是 “同类直接置换，异类必须过渡”，不同类型流动相操作步骤不同，直接影响仪器安全。

1.同类流动相更换（如甲醇↔乙腈）

这类流动相互溶且无反应风险，重点是置换沉子滤头中的残留：

1)将仪器的沉子滤头放入装有新流动相的烧杯中，轻轻晃动，充分置换滤头内残留的旧流动相；

2)把沉子滤头移入新流动相的溶剂瓶中，开启仪器 “排空” 模式，排出管路中的少量空气，待系统基线稳定后即可正常实验。

2.异类流动相更换（如甲醇 / 乙腈→含盐流动相）

这类更换风险最高，文章开头提到 “换了流动相，压力就突然升高是什么原因？”大概率就是高浓度有机相与盐相直接接触产生结晶，这种情况要注意使用过渡流动相：

1)先配制过渡流动相，如10%甲醇水溶液，将沉子滤头放入过渡液中，以 1mL/min 的流速冲洗系统60min，彻底置换管路和泵头内的旧有机相；

2)把沉子滤头放入装有新含盐流动相的烧杯中，轻轻晃动，置换滤头残留的过渡液；

3)最后将沉子滤头移入新流动相瓶，开启排空模式排出气泡，待系统基线稳定后，进行样品分析。

看完文章，这些知识点你get了吗？

不如做几道题测一下自己掌握的情况：

问题1：流动相最好“现用现配”，如果流动相瓶里长霉菌了，使用____溶液润洗。

问题2：配制好的流动相需先____再____以去除杂质和气体。

问题3：更换异类流动相（如甲醇→含盐流动相）时，需要使用____流动相避免结晶？