一、背景

维生素是婴幼儿配方奶粉中的必需营养成分，对婴儿生长发育至关重要。依据国家标准《GB 10765-2021 食品安全国家标准 婴幼儿配方食品》和《GB10766-2021 食品安全国家标准 较大婴儿配方食品》等的规定，婴幼儿配方奶粉中必须添加14种维生素，其中包括脂溶性维生素A、D、E。维生素A具有支持视力发育和免疫系统完善（如预防夜盲症）的功效；维生素D可促进钙吸收，强化骨骼发育；维生素E又名生育酚，是 α、β、γ 和 δ-生育酚以及 α、β、γ 和 δ-生育三烯酚等脂溶性维生素的总称，具有抗氧化作用，可保护细胞免受损伤。

本报告参考《T/SHFCA 002-2024 特殊医学用途配方食品中维生素A、D、E的测定 在线固相萃取-二维液相色谱法》，采用在线固相萃取方法，使用悟空K2025二维液相色谱系统，同时测定婴幼儿配方奶粉中维生素A、D、E的含量。该方法摒弃了复杂的样品前处理步骤，在保证分析结果准确性的前提下，显著优化了样品分析流程，大幅提升了样品分析效率。

二 原理

试样经皂化后，皂化液经离心、过滤后注入二维液相色谱系统；试样通过在线固相萃取柱浓缩净化后，经一维色谱柱分离维生素A和维生素E（α、β、γ 和 δ-生育酚）；再通过中心切割，维生素D经切阀、捕集后经二维色谱柱分离为维生素D2和D3。通过保留时间定性，外标法定量。

三、  结论

本实验使用悟空在线固相萃取-二维液相色谱系统，搭配vADE专用色谱柱，在一维系统中测定VA、δ-VE、β-VE、γ-VE和α-VE，二维系统中测定VD2和VD3，实验结果表明：VA、VD、VE的理论塔板数范围为116101~232455，均具有极佳的峰形；β-VE和γ-VE的分离度为1.76，VD2和VD3的分离度为2.35，均可实现良好分离；混合标准溶液连续进样6针进行重复性测试，VA、VD、VE保留时间的RSD 范围为0.03 %~0.09 %，峰面积的RSD范围为0.25 %~0.72 %，均具有良好的定性定量重复性；灵敏度测试中，VA、VD、VE的方法检出限范围为1.07 μg/100g~27.65 μg/100g，方法定量限范围为3.55 μg/100g~92.17 μg/100g，满足《T/SHFCA 002-2024 特殊医学用途配方食品中维生素A、D、E的测定 在线固相萃取-二维液相色谱法》对检出限及定量限的要求；VA、VD、VE在其线性浓度范围内均呈现良好的线性关系，相关系数R均＞0.9999；婴幼儿配方奶粉试样中VA、VD、VE的含量范围为0.0 mg/100g~10 mg/100g；两次独立测定结果的相对偏差范围为-0.85 %~4.58 %，满足《T/SHFCA 002-2024 特殊医学用途配方食品中维生素A、D、E的测定 在线固相萃取-二维液相色谱法》中规定的在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的15 %的要求；加标回收实验中，VA、VD、VE的回收率范围为98.0 %~106.0 %。因此，悟空在线固相萃取-二维液相色谱系统配置vADE专用色谱柱，可用于婴幼儿配方奶粉中维生素A、D、E含量的快速测定。