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华法林钠有关物质的测定 HPLC-DAD法

2026年03月04日

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华法林钠化学名为3-(α-丙酮基苄基)-4-羟基香豆素钠盐,为白色结晶性粉末,无臭,在水中极易溶解,在乙醇中易溶,在乙醚中几乎不溶。


华法林钠作为抗凝血药由《中国药典(2025年版)》二部所收录,临床用于防治血栓栓塞性疾病,包括深静脉血栓、肺栓塞及心肌梗死的辅助治疗,也应用于心脏瓣膜病术后、髋关节手术等血栓预防。


华法林钠及其有关物质在282 nm处有紫外吸收,使用反相高效液相色谱配置二极管阵列检测器进行测定。


通过对系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液、灵敏度溶液进行测定,实验结果表明:(1)系统适用性溶液色谱图中,4-羟基香豆素、亚苄基丙酮和华法林钠的保留时间分别为3.386 min、6.265 min和8.088 min,理论塔板数分别为13423、20681和17866,满足《中国药典(2025年版)》二部中系统适用性溶液色谱图中,理论塔板数按华法林钠峰计算应不低于2000的要求;4-羟基香豆素峰与亚苄基丙酮峰之间的分离度为19.78,亚苄基丙酮峰与华法林钠峰之间的分离度为8.76,满足《中国药典(2025年版)》二部中系统适用性溶液色谱图中,4-羟基香豆素峰与亚苄基丙酮峰之间的分离度应不小于10.0,亚苄基丙酮峰与华法林钠峰之间的分离度应不小于5.0的要求;

(2)4-羟基香豆素的特征吸收波长分别为227 nm、270 nm、280 nm和304 nm;亚苄基丙酮的特征吸收波长为288 nm;华法林钠的特征吸收波长分别为228 nm、272 nm、283 nm和306 nm;

(3)供试品溶液色谱图中,单个杂质峰面积均小于对照溶液主峰面积的0.5倍(63.801 mAU.s),各杂质峰面积的和(46.960 mAU.s)小于对照溶液主峰面积的2.5倍(319.003 mAU.s),满足《中国药典(2025年版)》二部中限度的要求;

(4)对照溶液连续进样7针重复性测试中,华法林钠保留时间的RSD为0.19 %,峰面积的RSD为0.26 %,具有良好的定性定量重复性;

(5)灵敏度溶液色谱图中,华法林钠灵敏度溶液的信噪比S/N为351.1。

因此,悟空 K2025高效液相色谱仪满足《中国药典(2025年版)》二部中华法林钠有关物质测定的需求。

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