背景

蛋氨酸羟基类似物（MHA）作为一种重要的蛋氨酸替代物，凭借良好的生物利用率、稳定性及成本优势，被广泛应用于饲料工业中，对促进畜禽生长发育、提高饲料转化率具有关键作用。饲料中MHA的含量直接关系到饲料营养价值、养殖效益及动物产品质量安全，因此，建立一种准确、高效、便捷的MHA含量测定方法具有重要的现实意义，此方法可为饲料行业的质量管控提供科学、可靠的技术手段。

标准GB/T19371-2025将于2026年3月1日起实施，代替GB/T19371.2-2007饲料中蛋氨酸羟基类似物的测定。与GB/T19371.2—2007相比，主要技术变化如下:

a)适用范围增加了精料补充料和混合型饲料添加剂；

b)流动相由三氟乙酸乙腈水溶液更改为甲酸乙腈水溶液；c)更改了标准品的要求及相关规定；

d)增加了标准系列溶液要求；

e)精密度要求由5%更改为10%。

试样中的蛋氨酸羟基类似物用10%乙腈水溶液提取，氢氧化钾溶液水解，经反相高效液相色谱法配置紫外-可见光检测器测定，以保留时间定性，外标法定量。

结论

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定饲料中蛋氨酸羟基类似物的含量。实验以甲酸乙腈水溶液为流动相，使用反相色谱法配置紫外-可见光检测器进行测定，实验结果表明：（1）氨酸羟基类似物的保留时间为12.892min，理论塔板数为18029，拖尾因子为0.90，具有良好的峰形；

（2）蛋氨酸羟基类似物标准溶液（浓度为20μg/mL）连续进样7针进行重复性测试，蛋氨酸羟基类似物保留时间的RSD为0.15%，峰面积的RSD为0.23%，具有良好的定性定量重复性；

（3）灵敏度测试中，蛋氨酸羟基类似物的仪器检出限为0.076μg/mL，仪器定量限为0.253μg/mL，方法定量限为2.53×10⁴%满足《GB/T19371-2025饲料中蛋氨酸羟基类似物的测定高效液相法》中配合饲料、浓缩饲料、精料补充料的定量限为0.03%，添加剂预混合饲料和混合型饲料添加剂的定量限为0.1%的要求；

（4）蛋氨酸羟基类似物在1μg/mL~80μg/mL浓度范围内呈现良好的线性关系，确定系数R²＞0.999；

（5）市售饲料试样中蛋氨酸羟基类似物的含量为1.58×10^-3%，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的偏差为6.8%，满足《GB/T19371-2025饲料中蛋氨酸羟基类似物的测定高效液相色谱法》中规定的该值不超过10%的要求；加标回收实验中，蛋氨酸羟基类似物的加标回收率为96.3%。

因此，悟空K2025高效液相色谱仪可以满足《GB/T19371-2025饲料中蛋氨酸羟基类似物的测定高效液相色谱法》中对饲料中蛋氨酸羟基类似物含量测定的需求。