背景

左旋肉碱，又称L-肉碱、维生素BT，是具有生理活性的肉碱光学异构体，可促进脂肪酸β-氧化，调节线粒体内酰基比例并参与能量代谢调控；同时参与支链氨基酸代谢产物的转运，保障支链氨基酸正常代谢。在酮体清除与利用过程中，左旋肉碱同样发挥关键作用，可作为生物抗氧化剂清除自由基、稳定细胞膜结构，进而提升机体免疫力与抗应激、抗病能力。目前左旋肉碱也广泛应用于体重管理领域，作为可促进脂肪转化为能量的类氨基酸物质使用。

标准《GB5009.300-2025食品安全国家标准食品中左旋肉碱的测定》于2025年3月16日发布，已于2025年9月16日实施，该标准与GB29989-2013相比，主要变化有：标准名称更改为《食品安全国家标准食品中左旋肉碱的测定》；更改了分光光度法；增加了“第二法柱前衍生-高效液相色谱法”；增加了“第三法液相色谱-串联质谱法”。本文参考GB5009.300-2025中第二法左旋肉碱的含量测定方法，为食品中左旋肉碱的检测提供参考。

原理

试样中的左旋肉碱经稀盐酸提取、碱皂化、乙腈沉淀蛋白后，用阳离子交换固相萃取柱净化。净化液中的左旋肉碱在氯甲酸丁酯、三乙胺的催化下与L-丙酰胺-β-萘胺发生衍生反应，衍生物用高效液相色谱仪测定。依据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。

结论

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定牛奶中左旋肉碱的含量。本实验以甲醇-乙腈（1:1，v/v）溶液：磷酸盐缓冲溶液=37：63为流动相，使用反相色谱法配置紫外-可见光检测器进行测定，实验结果表明：

（1）左旋肉碱衍生物的保留时间为11.633min，理论塔板数为29768，拖尾因子为1.21，具有良好的峰形；

（2）左旋肉碱标准溶液（浓度为5μg/mL）连续进样7针进行重复性测试，左旋肉碱衍生物保留时间的RSD为0.07%，峰面积的RSD为0.24%，具有良好的定性定量重复性；

（3）灵敏度测试中，左旋肉碱的仪器检出限为0.004μg/mL，仪器定量限为0.014μg/mL；方法检出限为0.008mg/100g，方法定量限为0.028mg/100g，满足《GB5009.300-2025 食品中左旋肉碱的测定》第二法柱前衍生-高效液相色谱法中液态试样的方法检出限为0.12 mg/100g，定量限为0.4mg/100g的要求；

（5）含量测定中，市售牛奶试样中左旋肉碱的含量为1.10mg/100g；在重复性条件下获得的两次独立测定结果的偏差为2.8%，满足《GB5009.300-2025食品中左旋肉碱的测定》第二法柱前衍生-高效液相色谱法中规定的该值不超过10%的要求。

因此，悟空K2025高效液相色谱仪可以满足《GB5009.300-2025食品中左旋肉碱的测定》第二法柱前衍生-高效液相色谱法中对牛奶中左旋肉碱含量测定的需求。