背景

对羟基苯甲酸酯类防腐剂也称尼泊金酯，作为国家批准限量使用的食品添加剂，主要用于食品、药品和护肤品中。研究表明，对羟基苯甲酸酯是一种雌激素，其活性会随着碳链的增加而增强，从而影响人体的内分泌，甚至可能与乳腺癌的发生存在联系。因此对其进行精准检测十分必要。

标准《GB5009.31-2025食品安全国家标准食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》于2025年3月16日发布，已于2025年9月16日实施，本标准与GB5009.31-2016相比，主要变化有：标准名称修改为《食品安全国家标准食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》；增加了方法的基质适用范围；增加了对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸庚酯的检测方法；修改了第一法气相色谱法的前处理方法、仪器条件和线性范围；增加了第二法高效液相色谱法；增加了第三法液相色谱-串联质谱法。

本文参考《GB5009.31-2025食品安全国家标准食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》，对食品中7种对羟基苯甲酸酯类化合物进行测定，使用悟空K2025HPLC，配置紫外-可见光检测器，为食品中9种对羟基苯甲酸酯类化合物的含量测定提供参考。

原理

试样用甲醇-水溶液提取，经混合型强阴离子交换固相萃取柱净化和富集，用配备紫外可见光检测器的高效液相色谱仪测定。依据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。

结论

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定市售饮料试样中对羟基苯甲酸酯类化合物的含量。本实验以乙腈和0.1%磷酸水溶液为流动相，使用梯度洗脱反相色谱法配置紫外-可见光检测器进行测定，实验结果表明：

（1）对羟基苯甲酸酯类化合物的理论塔板数范围为26945~1927570，拖尾因子范围为1.03~1.34，均具有良好的峰形；对羟基苯甲酸酯类化合物的分离度范围为2.23~58.54，均可实现良好分离；

（2）对羟基苯甲酸酯类化合物混合标准溶液（浓度均为2.0μg/mL）连续进样7针进行重复性测试，保留时间的RSD范围为0.00%~0.06%，峰面积的RSD范围为0.05%~0.17%，均具有良好的定性定量重复性；

（3）对羟基苯甲酸酯类化合物的仪器检出限范围为0.001μg/mL~0.003μg/mL，仪器定量限范围为0.005μg/mL~0.011μg/mL，方法检出限范围为0.003mg/kg~0.007mg/kg，方法定量限范围为0.009mg/kg~0.023mg/kg，满足《GB5009.31-2025食品安全国家标准食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》第二法高效液相色谱法中对羟基苯甲酸酯类化合物的检出限为0.6mg/kg，定量限为2mg/kg的要求；

（5）市售饮料试样中对羟基苯甲酸的含量为0.406mg/kg；在重复性条件下获得的两次独立测定结果的偏差为4.07%，满足《GB5009.31-2025食品安全国家标准食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》第二法高效液相色谱法中规定的该值不超过10%的要求；加标回收实验中，7种对羟基苯甲酸酯类化合物的加标回收率分别为90.2%、92.0%、92.3%、93.4%、97.0%、98.4%和101.0%。

因此，悟空K2025高效液相色谱仪可以满足《GB5009.31-2025食品安全国家标准食品中对羟基苯甲酸酯类化合物的测定》第二法高效液相色谱法中食品中对羟基苯甲酸酯类化合物含量测定的需求。